操作方法
1.试剂与材料 甲醇、乙腈、25%~28%的氨水、三氯乙酸、柠檬酸、辛烷磺酸钠、甲醇水溶液、1%的三氯乙酸溶液、5%氨化甲醇溶液、离子对试剂缓冲液、三聚氰胺标准品(CAS108-78-01,纯度>99.0%)、三聚氰胺标准储备液(1mg/mL)。所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。阳离子交换固相萃取柱、定性滤纸、海砂、微孔滤膜、氮气(纯度≥99.999%)。 2.所采用的分析设备 该方法主要是通过高效液相色谱仪、分析天平、离心机、超声波水浴器、固相萃取装置、氮气吹干仪等设备共同完成的。 3.处理样品的程序 首先进行样品的提取 第一,如果是奶粉、酸奶等可以准确称量2g试样到50ml的离心管中,然后加入15ml三氯乙酸溶液和5ml乙腈,运用超生提取10分钟,然后 进行震荡提取,时间同样是10分钟,速度要不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后,用三氯乙酸溶液定容至25ml,移取5ml滤液,加入5ml水混匀后做待净化液。 第二,针对奶酪、奶油等固态奶的处理方法同样是称取2g的试样置于研钵中,加入海砂,研磨成干粉,然后程序与液态奶相同。 其次,对样品进行净化处理 首先要将净化的液体转移到固相萃取柱中,依次用3mL水和3mL甲醇洗涤,抽至近干后,用6mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干,残留物(相当于0.4g样品)用1mL流动相定容,涡旋混合1min,过微孔滤膜后,供HPLC测定。