操作方法
很多人在单克隆抗体的制备时融合用的瘤细胞是在细胞瓶中所养的瘤细胞，据我所知大部分的生物公司是这样做的。这样做有一下好处A细胞能够快速繁殖，能够大大缩短瘤细胞准备时间；B节省小鼠同时节省相应的花费 C 大概知道每瓶细胞的细胞个数减少融合时繁琐的级数过程，同时这样做也有一些弊端 A 融合时要确保细胞正处于对数生长期，以达到细胞有较强的细胞活性，此项最难掌握，很多人没有掌握此项导致融合后细胞阳性率较低； B 需要大量的细胞瓶来完成细胞数量的问题。 这种采用瓶养细胞的做法本人不是很赞成。
第二中方法本人极力推荐 先将SP2/0细胞少量在瓶中培养（75cm2细胞瓶就足够），待细胞长满瓶底后，将细胞吹下，用0.5ml不含血清的1640培养基重悬，将其注射小鼠背部皮下，10-14天后将长出瘤细胞，注意不要让瘤细胞将小鼠背部皮肤涨破，将瘤细胞采下用淋巴细胞分离液将其分离出即可进行融合。此法的好处有 A 细胞采用活体分离细胞活性良好，融合后可达80%以上融合率甚至更高，本人做过一次达到99%的阳性率的（几乎每孔都有融合细胞）。 B 细胞量较大，采集一只小鼠的瘤细胞一般可做2-3次细胞融合（每次用细胞1-2x107个细胞） 缺点：a 细胞准备时间长（若要 生长速度加快， 可加倍注射细胞量，本人做过最快的是一周细胞长好）b 细胞采集过程麻烦
以上两种方法均可，本人都曾尝试过，但不建议使用第一种方法，因为我们追求的是实验的成功几率。不能因为方法麻烦就不采用该方法。祝大家实验成功生活愉快！