细菌电转化法感受态细胞的制备具体步骤

首先，由-80摄氏度冰箱中保存的菌落划单菌落，过夜培养大约16-20小时，将新鲜的单菌落接种于5ml的SOB培养基的试管中，在37摄氏度180r/min震荡培养过夜。

然后，取培养物500微升转接入含50mlSOB培养基的500ml摇瓶中，在200r/min37摄氏度下振荡培养至OD600约为0.5，将细菌培养物置于冰水混合物中骤冷半小时。

然后，用预冷的50ml离心管于4摄氏度5000r/min下离心五分钟，再收集菌体，将上清液弃去。

然后，用预冷的水轻轻重悬菌液，先加入少量水重悬菌体，然后把水加满，在4摄氏度5000r/min下离心五分钟，弃上清液。

然后，再用10%甘油重复步骤四两遍，在4摄氏度5000r/min下离心五分钟，最后一次倒尽上清液后，用残存管底的甘油悬浮细胞。

最后，分装100微升到数个Eppendorf管中，然后放入液氮中进行中速冻，并保存于-80摄氏度下的冰箱中。