小量质粒提取

作者:哈哈小脸 | 创建时间: 2023-08-10
构建载体过程中必备环节---质粒提取(Axygen试剂盒)...
小量质粒提取

操作方法

1-5 mL过夜培养的大肠杆菌菌液。1 min,12000 rpm离心,去除上清

加入250 μL悬浮液,重新悬浮细胞。

加入250 μL裂解液,上下轻轻颠倒,至液体变澄清,再加入10 μL碱性蛋白 酶,混勻。静止1 min。

加入350 μL中和液,点到混勻,离心10 min 12000 rpm。

取上清转移到柱子里边,离心1 min 12000 rpm。

弃废液,加入750 μL洗涤液,离心1 min 12000 rpm。

弃废液加入250 μL洗涤液,重复(6)—次。

将柱子转移到新的离心管中,加入100μL左右PCR水中,静止5min。离心1 min, 12000 rpm。保存于-20摄氏度。

温馨提示

离心机使用时配平
加入的试剂不要弄混,看清楚标签
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